肺癌是世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤。尽管近年来肺癌靶向治疗和免疫检查点抑制剂发展迅速，但总体疗效仍不能令人满意。特别是对于晚期多线治疗失败的的肺癌患者来说，治疗选择有限且预后较差。因此，迫切需要寻找有效低毒的新方法。新生抗原，是肿瘤特异性抗原，因其肿瘤特异性和免疫原性而被认为是肿瘤免疫治疗的终极靶点。基于新生抗原的树突状细胞（DC）疫苗在治疗某些恶性肿瘤方面已显示出令人兴奋的疗效。

由华西医院、上海十院、裕策生物合作发起的一项单臂队列研究（CHICCTR-ONC-16009100，NCT02956551），初步证实基于个体化新生抗原肽 DC 疫苗（下称为 Neo-DCVac）在晚期复发肺癌患者的安全性和有效性，相关研究成果发表在Signal Transduction and Targeted Therapy。裕策生物在本项研究中提供基于TruNeo™ 算法的新生抗原预测工作。

Signal Transduction and Targeted Therapy (IF=13)

研究设计

本项研究共纳入从2017年11月到2019年9月华西医院和同济大学第十人民医院招募的18例复发的晚期肺癌患者。除 3 号病人活检失败外，对余下的17 例患者的肿瘤和血液标本进行高通量测序。每位患者分别进行全外显子测序和RNA测序，以及TruNeo™ 新生抗原分析，用于筛选候选新生抗原。此外，由于新表位数量不足（患者5和11）、HLA LOH（患者13）和死亡（患者9和10）等原因，5名患者被排除在外。对余下的12例患者，每位患者选取12-30个基于肽的新生抗原进行免疫，共接种疫苗85次，中位数为5剂/人（范围：3~14剂/人）。

图1 研究设计

研究结果

1制造新型 DCVac 的可行性

根据预测算法合成多肽—通过白细胞分离法收集外周血单核细胞（PBMC）--人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和人白细胞介素-4 （IL-4）诱导分化成树突状细胞--DCs 脉冲--制备新 DCVac。从可行性上看，制备新 DCVac 在所有患者中都是可行的。

研究者对 12 例患者进行了 17 次白细胞分离，获得的 PBMC 中位数为 2.55× 109（范围为 4.14×109~1.50×109），DCs 生成的中位数为 1.80×108（范围:0.70×108 -4.33×108），总共产生 85 剂 Neo-DCVac，每位患者 5 剂。这些 Neo-DCVac 产品中位活细胞百分比为81%（范围 71 - 94%），每剂疫苗活细胞中位数为 1.60×107（范围:0.65×107 - 2.4×107）。成熟树突状细胞 IL-12p70 的分泌量明显增多。并且这些 DC 疫苗产品未检出支原体，细菌或真菌，未含有内毒素。从活检到首次接种疫苗的中位时间是 2.8 个月（范围：2.1-3.5 个月）。

2Neo-DCVac 用药安全性

患者在注射Neo-DCVAC前1天给予环磷酰胺250 mg/m2预处理。制备的Neo-DCVAC于第0天双侧腋窝和腹股沟皮下接种。GM-CSF剂量为0.075 mg，连续5天（第1~5天）。对至少接受一剂 Neo-DCVac 的 12 名患者的安全性和耐受性进行了评估， Neo-DCVac 治疗效果良好。所有患者仅出现 1 级反应或 1 级中性粒细胞减少，或少许部位出现 2 级瘙痒等，5 名患者继续使用 ICIs 治疗期间，也并未增加不良事件相关风险，没有导致治疗延后或停止（图2）。

图2 所有患者治疗相关的不良反应

3Neo-DCVac 治疗的总体疗效

每个接种周期包括第 1，2，4，6，8 周 5 个重复，在每个接种周期结束时， 进行彻底的 X 检查，并根据实体瘤疗效标准评估疗效。如果肿瘤得到控制，患者继续接受疫苗治疗，除此之外，患者更换到其他疗法。最终，12 例患者中，6 例（50%）靶病灶缩小，9 例（75%）疾病得到控制，3 例（25%）出现疾病进展，中位无进展生存期为5.5个月，中位总生存期为7.9个月。

图2 12名接受Neo-DCVAC治疗的患者的治疗时间线及生存分析

4Neo-DCVac 与 ICIs 的协同作用

研究者共招募了 4 名接受 ICIs 的患者，他们表现出原发性无应答或复发。Neo-DCVac 与 ICIs 协同治疗后，所有病人实现疾病控制（2PRs 和 2SDs）和肿瘤大小减少最多可达80%。其中一名接受 PD-1 抑制剂和 Neo-DCVac 联合治疗的经验值得注意，虽然治疗后 PBMC 对 3 种新抗原肽反应较强，但患者的左上肺肿瘤增加， 免疫后肝部转移减少。有趣的是，当联合使用 nivolumab 后，肿瘤缩小。总体来说，疫苗和ICIs的联合疗法呈现出延长患者生存的趋势。

图3 Neo-DCVac或Neo-DCVac联合ICIs治疗患者的PFS和OS

总结

这个研究证明了对于复发性晚期肿瘤患者，Neo-DCVac 是安全且可耐受的。所有与治疗相关的不良反应均为1-2级，没有因毒性作用而延迟给药。尽管所有入组患者都未达到 CR，但初步显示，接受个性化 Neo-DCVac 治疗的晚期肺癌患者的疾病控制率可达 75%。总而言之，本研究为新抗原疫苗治疗提供了新的证据，为肺癌的治疗提供了新的治疗机会。

关于裕策生物

裕策生物是国内最早开展新生抗原检测的公司。自成立以来，裕策生物团队对新生抗原检测技术不断深耕，并于2017年成为首家加入国际肿瘤新生抗原筛查联盟（Tumor Neoantigen SeLection Alliance，TESLA）的中国公司。裕策生物自主开发的TruNeo™ 智能机器学习算法经TESLA和天梯计划多年积累, 包含生物学推演+机器学习+实验验证，拥有经过实验验证的新生抗原阴阳性数据库、共有新生抗原数库，能够提高准确预测的肽段数量。同时，裕策生物围绕新生抗原检测及验证技术布局了一系列专利，包括“基于二代测序的新生抗原预测方法、装置和存储介质”、“一种新生抗原免疫原性的测试方法”、“同时检测新生抗原免疫原性和新生抗原特异性TCR的方法”等。