以PD-1/PD-L1单抗为代表的免疫治疗极大地改善了晚期实体瘤患者的生存，但仍有很大一部分患者无法从治疗中获益。多项研究表明肿瘤微环境与患者接受免疫治疗后的临床结局改善相关。本文精选了3项研究，就肿瘤微环境中TILs和PD-L1表达对患者免疫治疗疗效及预后的影响进行探索。

01

肿瘤浸润免疫细胞与NSCLC免疫治疗疗效的相关性研究

Joao V. Alessi等研究者收集了经多色免疫荧光检测的NSCLC的临床病理和基因组的数据。根据瘤内的PD-1+免疫细胞，CD8+和FOXP3+的T细胞，PD-L1+的肿瘤细胞和免疫细胞的数量，使用UMAP降维法将样本分为不同的免疫表型簇。采用无偏递归分割（URP）算法将接受过免疫单抗治疗的人群中获得客观缓解的优势人群汇总成簇。

结果:

307例患者经UMAP鉴定分为5类(A-E)；URP鉴定A和B簇的患者为对ICI治疗的优势人群。

与其他簇合并的人群相比，A和B簇合并人群的ORR更高(53.3% vs 4.3%)；mPFS显著更长(25.6m vs 3.7m，HR=0.12 ) ；mOS也显著更长(45.1m vs 22.3m，HR=0.25)。

经其他变量(体力状态、基因变异情况、治疗线数等)校正后，A和B簇合并人群仍旧表现出mPFS(HR=0.08，P＜0.001)和mOS(HR=0.11，P＜0.001)的改善。

这些结果表明肿瘤浸润免疫细胞(TILs)联合PD-L1的免疫分型可作为NSCLC免疫治疗的预测标志物。

不同簇的临床病理特征

基于不同簇分层的患者的客观缓解率，中位PFS和中位OS

02

基线PD-L1表达和肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）状态可预测不可切除的局部晚期NSCLC患者放化疗后巩固免疫治疗的疗效研究

放化疗(CRT)后接受durvalumab治疗可改善不可切除局晚期NSCLC的预后。该研究纳入551例放化疗(CRT)后接受durvalumab治疗或单纯放化疗的不可切除局部晚期NSCLC，旨在评估基线免疫相关肿瘤微环境(TME)状态是否与疗效相关。研究者分别对两组患者CRT治疗前肿瘤细胞上的PD-L1表达和CD8阳性肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)密度进行了评估。

结果：

Durva组的无进展生存期(PFS)显著大于单纯CRT组(未达到 vs12.9个月:P=0002)。

在单纯CRT组中，PD-L1表达和TIL状态均不影响PFS;相反，在Durva组中，CD8阳性TIL的高密度(高TIL，≥100/mm2)和PD-L1表达阳性(PD-L1+，肿瘤比例评分≥1%)与PFS延长显著相关(TIL:未达到vs95个月;P=0.002:和PD-L1:未达到vs77个月;P=0003)。

在EGFR突变或ALK重排的患者中，组间PFS无显著差异(Durva vs 单纯CRT: 9.9 vs14.0个月;P=077)。

研究结果表明，基线PD-L1表达和CD8阳性TIL的高密度可作为CRT后durvalumab治疗疗效的预测标志物。

根据CD8+TIL和PD-L1的表达分层的CRT组合Durva组患者的PFS

03

多色免疫荧光（mIF）检测肿瘤免疫微环境（TIME）：NRG Oncology NSABP C-08研究中评估免疫微环境标志物与预后及贝伐珠单抗（bev）治疗获益的相关性研究

dMMR和pMMR结肠癌患者有显著不同的预后和治疗应答， Pogue-Geile等使用多色免疫荧光检测技术，对1507例肿瘤组织标本定量分析免疫细胞和免疫检查点蛋白(ICPs)，旨在探究免疫浸润与bev获益间的关系，以及dMMR和pMMR患者对免疫检查点抑制剂应答差异的原因。

结果：

CD8细胞与较好的预后相关(p=0.0012)，但与bev获益无关(p=0.73)。

大多数dMMR肿瘤具有高浸润的T细胞和ICP染色细胞，但相反，大多数pMMR肿瘤具有低浸润的免疫细胞。

基质中的T细胞与pMMR患者较好的预后相关，但在dMMR患者中则不然；基质中的T细胞和ICP在dMMR中与bev受益相关，而在pMMR中则没有。

CD8 TILs和PD-1细胞与bev在dMMR中的获益和在pMMR中的疗效不佳的预测因子。

这项研究提示，将免疫“冷”肿瘤（无免疫原性肿瘤）转化为“热”肿瘤（免疫原性肿瘤）涉及的不仅仅是增加进入浸润性免疫细胞数量。这对于使用免疫检查点抑制剂治疗患者可能具有参考意义。

T细胞与ICP在dMMR和pMMR患者中的相关性

在dMMR中，高CD8和PD1细胞与bev的获益有关，而在pMMR中与bev的疗效不佳有关

总结

肿瘤微环境（TME）有着高度的复杂性、异质性及其对抗肿瘤免疫和免疫逃逸也有重要的影响，使用多色免疫荧光检测评估肿瘤微环境，将为解析免疫治疗的获益机制以及识别免疫治疗的获益人群提供更多的帮助。

裕策生物的I-O GPS （肿瘤免疫微环境检测）产品，采用多色免疫组化/多色免疫荧光（mIHC/mIF）技术，可同时对PD-1、PD-L1、CD8、FoxP3、CD68、PanCK等六个靶标进行全面评估，提示细胞毒性T细胞、调节T细胞、巨噬细胞等在肿瘤免疫微环境中的浸润，以及PD-1/PD-L1检查点蛋白的表达情况。依托国际标准搭建病理分析平台，所有靶标均已经过严格的准确度和精密度测试。相比于单指标检测，I-O GPS可全面精准解析肿瘤免疫微环境，为癌症患者的肿瘤免疫治疗保驾护航。

参考材料：

[1]  Abstr9119：Clinicopathologic and genomic correlates of tumor-infiltrating immune cells and immunotherapy efficacy in NSCLC.

[2] Shirasawa M, Yoshida T, Imabayashi T, et al. Baseline PD-L1 expression and tumour-infiltrated lymphocyte status predict the efficacy of durvalumab consolidation therapy after chemoradiotherapy in unresectable locally advanced patients with non-small-cell lung cancer. Eur J Cancer. 2022;162:1-10.doi:10.1016/j.ejca.2021.11.013

[3] Abstr 3516:Examination of the tumor immune microenvironment(TIME) with multispectral immunofluorescence(m-IF):Association of markers with prognosis and bevacizumab(bev) benefit in NRG Oncology/NSABP C-08.